經(jīng)常制備單細(xì)胞懸液的科研人員常會(huì)遇到這樣的困擾:即便嚴(yán)格遵循既定步驟操作,制備出的單細(xì)胞懸液活率卻依舊偏低,這背后究竟隱藏著哪些不為人知的原因呢?
細(xì)胞懸液活率偏低相關(guān)原因的介紹:
1、酶的影響
用不同消化酶制備單細(xì)胞,活率是不同的。如果酶的消化能力較低,容易消化不充分,殘留的細(xì)胞團(tuán)會(huì)影響細(xì)胞活性;如果酶的消化能力很強(qiáng),容易消化過(guò)度,損傷細(xì)胞膜,造成細(xì)胞活率偏低,因此,合適的消化酶至關(guān)重要。
2、時(shí)間把控
細(xì)胞離體時(shí)間越久,死亡率越高,找到合適的酶,短時(shí)間內(nèi)制備好,細(xì)胞活率較高;時(shí)間過(guò)短時(shí),組織還沒(méi)消化好,活率也是不佳的,要探究合適的消化時(shí)間。
3、樣本取材
①組織類型:神經(jīng)、胰腺等一些組織細(xì)胞間連接緊密,細(xì)胞脆弱,分離時(shí)易受損,如果組織受損,盡量避開(kāi)損傷部位取材。
?、诮M織處理:組織血液較多時(shí),要多次清洗,洗掉表面粘連的紅細(xì)胞;組織本身血液較多時(shí),做完后要裂紅,避免紅細(xì)胞碎片影響細(xì)胞活率。
?、蹣颖颈4媾c運(yùn)輸:保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、溫度不適或運(yùn)輸過(guò)程震蕩等,會(huì)使細(xì)胞缺氧、代謝異常,活性下降。
4、操作環(huán)境與人為因素
?、贌o(wú)菌操作:操作過(guò)程中微生物污染,會(huì)與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)、產(chǎn)生毒素,導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
?、诓僮魇炀毝龋翰僮魅藛T技術(shù)不熟練,增加細(xì)胞在體外的暴露時(shí)間,使細(xì)胞活性受損。
上海凈信的單細(xì)胞懸液制備儀,可有效避免以上原因,搭配專屬的消化酶試劑盒,能夠根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)需求精準(zhǔn)選擇最適宜的消化酶。簡(jiǎn)化了操作步驟,操作簡(jiǎn)單,每一款儀器都經(jīng)過(guò)大量的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,精準(zhǔn)匹配最佳程序,顯而易見(jiàn)的提升制備的單細(xì)胞活率與得率,提高實(shí)驗(yàn)的整體效率。
單細(xì)胞懸液制備儀應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)案例展示:
案例一:
小鼠脾臟單細(xì)胞懸液制備
臺(tái)盼藍(lán)染色、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)
細(xì)胞活率99%
小鼠脾臟
案例二:
小鼠肺單細(xì)胞懸液制備
PI染色,流式分析結(jié)果
細(xì)胞活率98.67%
小鼠肺
案例三:
小鼠肝單細(xì)胞活率
臺(tái)盼藍(lán)染色,細(xì)胞計(jì)數(shù)儀局部圖片
小鼠肝
案例四:
小鼠胰腺單細(xì)胞懸液
細(xì)胞計(jì)數(shù)儀檢測(cè)報(bào)告
儀器展示:
上海凈信現(xiàn)有JX-DLDXB和JX-CKSM兩款儀器可供選擇。JX-DLDXB款專為處理量大的實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景設(shè)計(jì),其每個(gè)管道均可獨(dú)立運(yùn)行,輕松應(yīng)對(duì)大規(guī)模的單細(xì)胞制備任務(wù);而JX-CKSM款則完美契合臨床穿刺等特殊實(shí)驗(yàn)需求,雖然每管處理量相對(duì)較少,但卻能實(shí)現(xiàn)高效的批量處理,為單細(xì)胞制備提供強(qiáng)大助力。