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微流控Drop-seq單細胞測序技術
技術文章 2023-05-16

  高通量液滴微流控Drop-seq單細胞測序技術是一種可快速分析數(shù)千個單細胞的實驗方法,通過對細胞包裹在微滴中的操作,可進行RNA雜交,且生成mRNA轉(zhuǎn)錄物,對其制作細胞基因表達譜,可進一步分析mRNA轉(zhuǎn)錄物的起源細胞。


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  微流控Drop-seq也是一種單細胞RNA測序技術,通過在微滴中去捕獲單細胞并擴增RNA來獲取生物細胞的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)。生物細胞可通過微滴分離可分解細胞,在微滴中加入反轉(zhuǎn)錄酶和barcodebeads珠,且這類珠子可以被反轉(zhuǎn)錄酶轉(zhuǎn)錄為RNA,可在RNA末端加入一個序列,從而標記每一個RNA分子及其細胞來源;通過PCR擴增這些標記的RNA分子,可將其構建成一個文庫,可對其進行高通量測序,從而可獲得單細胞的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)。

  

  通過微流控技術,可將捕獲RNA的微珠和單細胞同時包裹在液滴中,然后在液滴中可完成細胞MRNA的富集,然后合并微珠,可完成生物細胞的建庫并測序;基于微流控液滴的單細胞測序可在短時間內(nèi)同時批量處理更多生物細胞,但由于微珠捕獲MRNA的限制,該方法可在獲得細胞數(shù)量的同時測到減少的基因數(shù)。


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  Drop-seq技術與其他的細胞測序技術相比,它可以在細胞數(shù)量有限的狀態(tài)下實現(xiàn)單細胞RNA測序,且具有高通量、高靈敏度和高特異性等性能應用特點,被廣泛應用于單細胞轉(zhuǎn)錄組學研究;微流控Drop-seq單細胞測序技術在神經(jīng)科學、發(fā)育生物學、腫瘤學等多個行業(yè)研究領域也得到了廣泛的應用。


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