制備原代組織樣品的單細(xì)胞懸浮液，可應(yīng)用全自動(dòng)溫和組織處理系統(tǒng)，不但可以有效的防止細(xì)胞的過(guò)度損耗，還能使標(biāo)記靶細(xì)胞達(dá)到較大值，優(yōu)化細(xì)胞的分選；收集組織細(xì)胞標(biāo)本，還可制成細(xì)胞懸液以供下游分離。

　　通常細(xì)胞的培養(yǎng)會(huì)被分為懸浮培養(yǎng)和貼壁培養(yǎng)兩種，又因?yàn)榧?xì)胞的增殖有可能會(huì)形成不同大小的細(xì)胞塊狀或片狀結(jié)構(gòu)。若一塊中有兩個(gè)或更多的細(xì)胞粘連在一起或細(xì)胞碎片過(guò)多，都會(huì)影響FCM的結(jié)果，從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)的失敗。因此，合格的培養(yǎng)單細(xì)胞懸液制備是非常重要的，進(jìn)而就應(yīng)用到了全自動(dòng)溫和組織處理器。

培養(yǎng)樣品單細(xì)胞懸液分離的制備方案

　　1、應(yīng)用百分之0.04的乙二胺四乙酸二鈉鹽或是百分之0.29的胰蛋白酶進(jìn)行消化3~7分鐘，時(shí)間主要是取決于室溫的狀況，直到光鏡下壁的細(xì)胞間出現(xiàn)篩狀的間隙，然后放棄消化液，加入PBS液體。

　　2、使用一根吸管將其細(xì)胞從瓶壁中輕輕吹出，然后移入離心管內(nèi)。

　　3、進(jìn)行低速的短期離心，即800~1000r/min，5分鐘即可。

　　4、棄上清，加pH7.4的PBS溶液，短時(shí)低速離心，重復(fù)進(jìn)行2~3次，去除細(xì)胞懸液中的細(xì)胞碎片。

　　5、加入少量的PBS液體，輕吹均勻沉淀池。增加固定液或低溫保存，等待下次應(yīng)用。

　　因此在做細(xì)胞培養(yǎng)制備時(shí)，還需全自動(dòng)溫和組織處理系統(tǒng)的應(yīng)用，可更好更完善的分離細(xì)胞懸浮液，獲得自己所需的制備樣品。